cck8实验原理

时间:2024-09-03 17:44:19编辑:思创君

cck8实验原理是什么?

实验原理如下:CCK8基于水溶性四唑盐WST8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料(formazan)。甲臜染料能够溶解在组织培养基中,与活细胞数量成正比。通过比色,可以动态地量化活细胞的数量,从而对细胞增殖或药物毒性进行检测。优点: 1、使用方便,无需洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂。2、CCK-8法能快速检测。CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度。 CCK-8法的重复性优于MTT 法,产生的formazan 是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差。3、CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高。

cck8实验原理是什么?

cck8实验原理是如下:一、实验原理:细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。二、用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。三、优点: 使用方便,无需洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂。CCK-8法能快速检测。CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度。 CCK-8法的重复性优于MTT 法,产生的formazan 是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差。 CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高。CCK-8细胞活性检测试剂无需预制,即开即用。

MTT实验和CCK8的区别

CCK8,即Cell Counting Kit-8,与MTT法的主要区别如下:一、原理不同1、Cell Counting Kit-8:CCK-8 试剂盒利用了日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)。2、MTT法:其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。二、特点不同1、Cell Counting Kit-8:灵敏度高,数据可靠,重现性好;操作简便,省时省力;水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞;无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低;适合于高通量药物筛选。2、MTT法:特点是灵敏度高、经济。三、应用不同1、Cell Counting Kit-8:主要用途为药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。2、MTT法:广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。参考资料来源:百度百科-Cell Counting Kit-8百度百科-MTT法

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