双缩脲试剂

时间:2024-11-11 07:00:56编辑:思创君

双缩脲和双缩脲试剂有什么区别?

1、作用不同斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。2、使用方法不同斐林试剂是在甲、乙两液等量混合后立即使用,而使用双缩脲试剂时应先加入A液1mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀,再观察实验现象。3、组成成分不同斐林试剂和双缩脲试剂虽然都由NaOH和CuS04两种成分配制而成,但是用量上还是有所不同。斐林试剂分为甲液和乙液两种,其中甲液为0.1g/mL的NaOH溶液,乙液为0•05g/mL的CuS04溶液。双缩脲试剂分为A液和B液,其中A液为0.1g/mL的NaOH溶液,B液为0.01g/mL的CuS04溶液。注意事项:在使用双缩脲试剂时候,必须注意,必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液,再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液,再加入氢氧化钠[NaOH]溶液,则无法充分制造碱性环境,此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应,生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀,导致现象不清,无法较好地达到实验目的。以上内容参考 百度百科—双缩脲试剂、百度百科—双缩脲

双缩脲试剂a液和b液分别是什么?

双缩脲试剂A是氢氧化钠溶液,双缩脲试剂B是硫酸铜溶液。斐林试剂的甲液是0.1g每ml的naoh溶液。乙液是0.05g每ml的cuso4溶液。双缩脲试剂的a液是0.1g每ml的naoh溶液。b液是0.01g每ml的cuso溶液。斐林试剂是检测还原糖的,需要将甲液和乙液按相同比例混合,摇匀,不让沉淀沉在试管底部,然后加入到还原糖中,水浴加热5-6min就会出现砖红色沉淀。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。

双缩脲反应原理是什么?

双缩脲试剂检测蛋白质原理是双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多和双缩脲结构相似的肽键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度。双缩脲法测定蛋白质的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好,双缩脲试剂可以长期保存。缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

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